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原理：活細(xì)胞和未染色的生物標(biāo)本，因細(xì)胞各部細(xì)微結(jié)構(gòu)的折射率和厚度的不同，光波通過時(shí)，波長(zhǎng)和振幅并不發(fā)生變化，僅相位發(fā)生變化（振幅差），這種振幅差人眼無(wú)法觀察。而相差顯微鏡通過改變這種相位差，并利用光的衍射和干涉現(xiàn)象，把相差變?yōu)檎穹顏?lái)觀察活細(xì)胞和未染色的標(biāo)本。

相差顯微鏡和普通顯微鏡的區(qū)別是：用環(huán)狀光闌代替可變光闌， 用帶相板的物鏡代替普通物鏡，并帶有一個(gè)合軸用的望遠(yuǎn)鏡。相差顯微鏡一般都具有明場(chǎng)顯微鏡的功能。

測(cè)試一：通過圖片來(lái)對(duì)比相差和明場(chǎng)，樣品呈現(xiàn)出的不同效果，樣品由廣西民族大學(xué)某實(shí)驗(yàn)室提供。（設(shè)備：奧林巴斯CKX41；相機(jī)：廣州明美顯微成像系統(tǒng)MC25；樣品：培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)的細(xì)胞）

使用10倍的明場(chǎng)物鏡，細(xì)胞的形態(tài)并不清晰

使用10倍的相差聚光鏡和物鏡，細(xì)胞以浮雕感的形態(tài)清晰地呈現(xiàn)

所以：需要做細(xì)胞培養(yǎng)的科學(xué)實(shí)驗(yàn)，相差顯微鏡是必不可少的基礎(chǔ)工具。

測(cè)試二，使用平場(chǎng)物鏡和相差物鏡拍攝熒光染色細(xì)胞，圖像有何區(qū)別： （設(shè)備：奧林巴斯CKX41；相機(jī)：廣州明美顯微成像系統(tǒng)MC25；樣品：培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)的細(xì)胞）

使用10倍平場(chǎng)物鏡的細(xì)胞熒光染色圖片

使用10倍相差物鏡拍攝的細(xì)胞熒光圖片

可以得出：使用平場(chǎng)物鏡拍攝熒光圖片亮度更亮。原因是相差物鏡內(nèi)含有相差環(huán)，會(huì)阻擋部分光線。建議在拍弱熒光時(shí)，務(wù)必使用平場(chǎng)物鏡。