體視顯微鏡在雞蛋胚胎觀察中的應用
在大量的化妝品廣告中我們都能夠聽到“無刺激,低刺激,零刺激”等宣傳語,那么除了自體測試以外實驗室是怎么測試化妝品的刺激性呢?
現(xiàn)在實驗室中已經(jīng)用雞胚模型代替了大部分的動物實驗,因為孵化的雞蛋肛胎中期表面血管豐富,可以看作一個完整的生物體,且表面透明便于在實驗中觀察血管及其網(wǎng)絡的形態(tài)結(jié)構(gòu)、顏色和通透性的變化,結(jié)合絨毛尿囊膜蛋白質(zhì)性質(zhì)改變判斯其受損程度,評估受試物的刺激性。此研究方法經(jīng)濟,且實驗方法簡單,易操作。
實驗方法:將在恒溫恒濕孵育箱中孵育至第九天至第十天的受精雞蛋取出到無菌操作臺,從雞蛋的氣室端剪開蛋殼,小心剝?nèi)サ澳ぜ绰冻鲅芑慕q毛尿囊膜。肉眼觀察尿囊膜的完整性及有無出血點等變化,如有出血點或尿囊膜破損則剔除,不能用于進一步的實驗。將100μl 的液體受試物加入置于CAM 上限定面積的無刺激性橡膠環(huán)內(nèi),環(huán)直徑1.5cm。固體受試物0.11 g ,用水濕潤后,均勻的涂在直徑1.5 cm的無刺激性樹脂薄片上,與CAM 接觸。20s 后,用5ml 的溫熱蒸餾水輕輕沖洗。在一段時間之后用明美體視顯微鏡MZ101觀察絨毛尿囊膜上的血管及其網(wǎng)絡的形態(tài)結(jié)構(gòu)、顏色和通透性的變化(溶血、出血、凝血),結(jié)合絨毛尿囊膜蛋白質(zhì)性質(zhì)改變判斯其受損程度,評估受試物的刺激性。用顯微鏡相機MS60進行原位攝影,記錄及分析實驗結(jié)果。(顯微鏡搭配MZ101+MS60)。
雞胚模型實驗驗條件簡單,材料易于獲取,方法易于掌握,應用范圍廣泛可檢測洗滌類產(chǎn)品及其表面括性劑原料的刺激性、化妝品、護膚品、藥品等的毒性實驗,在日用化妝品公司、藥廠等都會應用。體視顯微鏡加成像系統(tǒng)是該實驗的必要配置。
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